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                EV-Save(TM) 細胞外囊泡封閉試劑 - 細胞外囊泡分析工具

                來源:作者:人氣:-發表時間:2020-03-24 15:03:00【
                內毒素檢測耗材
                EV-Save™細胞外囊泡封閉試劑 抑制細胞外囊泡對實驗耗材的吸附
                本品是抑制細胞培養上清中的細胞外囊泡吸附于樣本管或移液槍頭等實驗耗材的聚合物試劑。能防止實驗和保存時細胞外囊泡吸附所引起的損耗,提高回收率。本品可在細胞外囊泡(含外泌體)的超濾、提取和保存前使用。
                使用MagCapture™Exosome Isolation Kit PS(產品編號299-77603,293-77601)從細胞培養上清中提取外泌體時,搭配本品效果更佳。
                Wako Wako EV-Save™ 細胞外囊泡封閉試劑(貨號:058-09261),抑制細胞外囊泡對實驗耗材的吸附,可最大化的提高外泌體的使用率,是細胞外囊泡分析用工具。西寶生物作為WAKO的一級代理,品質保證,貨期穩定,詳情致電400-021-8158!
                EV-Save™ 細胞外囊泡封閉試劑(貨號:058-09261)
                【特點】
                • 抑制培養上清中或提取后細胞外囊泡對實驗耗材的吸附
                • 用法簡單,只需往樣本中添加本品即可
                【使用前提示】
                • 在血清、血漿或雜質較多的樣本中,本品的使用效果會受到影響。
                • 本品含有聚合物。若擔心聚合物會影響后續實驗的結果,請不要使用本品。
                案列一
                EV-Save™ 的吸附抑制效果~樣本管~ 
                下面來驗證一下,使用EV-Save™ 是否能抑制提取外囊泡對試管的吸附。
                【實驗條件】
                1. 用MagCapture™Exosome Isolation Kit PS(產品編號:293-77601)從COLO201細胞的培養上清中提取出外泌體。
                2. 將3ng/µL外泌體放入試管中靜置3分鐘。然后用移液器轉移到其他樣本管,重復本步驟4次以上。
                3. 在含EV-Save™的實驗組中,將EV-Save™按照1/100體積添加到樣本中,然后進行移液。
                4. 使用PS Capture™ 外泌體ELISA試劑盒(抗小鼠IgG POD)(產品編號:297-79201)對外泌體的CD63信號進行定量,驗證移液次數與外泌體減少比率的關系。
                將移液前的CD63信號設定為100%,相對值見圖表。
                EV-Save™ 的吸附抑制效果
                【結果】
                在普通樣本管和低蛋白吸附樣本管中,移液操作都會引起外泌體減少。而添加EV-Save™ 幾乎能完全抑制移液引起的外泌體損耗。
                案列二
                EV-Save™ 的吸附抑制效果~同時使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS~
                下面,在利用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS從TIG3細胞培養上清中提取外泌體的過程中,驗證添加EV-Save™ 是否能抑制外泌體的損耗。
                【實驗條件】
                1. 使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS,分別從1mL COLO201、TIG3和人iPS細胞的培養上清中提取外泌體,培養上清沒有經過超濾濃縮。
                2. 提取外泌體時分別進行了以下兩項操作,"往各個培養上清中添加/不添加EV-Save™","往MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS附帶的'Exosome Elution Buffer'中添加/不添加EV-Save™"。
                3. 使用PS Capture™ 外泌體ELISA試劑盒(抗小鼠IgG POD)(產品編號: 297-79201)對外泌體的CD63信號進行定量,并將其信號強度作為反應為外泌體量的標記。
                假設移液前的CD63信號為100%,相對值見圖表。
                同時使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS,EV-Save™ 的吸附抑制效果
                -/-: 培養上清沒有添加EV-Save™/ "Exosome Elution Buffer"沒有添加EV-Save™
                -/+: 培養上清沒有添加EV-Save™/ "Exosome Elution Buffer"添加了EV-Save™
                +/+: 培養上清添加了EV-Save™/ "Exosome Elution Buffer"添加了EV-Save™
                【結果】
                添加了EV-Save™ 的TIG3的細胞培養上清及MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS附帶的"Exosome Elution Buffer"實驗組,比兩者都沒添加的實驗組,外泌體的回收量增加了大約20%。  
                案列三
                超濾時EV-Save™的吸附抑制效果~人iPS細胞~
                接下來驗證人iPS細胞培養上清在進行超濾(Vivaspin 20,100K)濃縮前后,是否有發生外泌體損耗。
                超濾時EV-Save™的吸附抑制效果
                超濾后,培養上清中的外泌體會損耗大約60%,但添加EV-Save™后,幾乎能完全抑制超濾引起的外泌體損耗。
                案列四
                EV-Save™ 對細胞的毒性評估~人iPS細胞~
                接著,使用人iPS細胞檢驗EV-Save™的細胞毒性。將添加了1/100EV-Save™的達到1/5培養基量的TBS溶液加入培養基。人iPS細胞在配制好的培養基中培養3日,然后測量活細細胞數。
                EV-Save™ 對細胞的毒性評估
                EV-Save™幾乎不影響人iPS細胞的增殖。
                【使用方法】
                使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS(產品編號299-77603,293-77601)提取細胞培養上清中的細胞外囊泡。
                1. 將EV-Save™ 細胞外囊泡封閉試劑添加到細胞培養上清中,100倍稀釋于細胞培養上清,上下顛倒或輕敲使其混合。
                  ※ 細胞培養上清需要超濾濃縮時,請在濃縮前添加本品。
                2. 按照MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS的說明書進行實驗,直到"洗脫細胞外囊泡"這一步。
                3. 將EV-Save™ 細胞外囊泡封閉試劑添加到MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS附帶的"Exosome Elution Buffer"中,100倍稀釋于"Exosome Elution Buffer",顛倒或輕敲使其混合。
                4. 按照MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS說明書洗脫細胞外囊泡。
                5. 保存洗脫后的細胞外囊泡,或者進行后續實驗。
                使用其他方法從細胞培養上清中提取細胞外囊泡。
                1. 將EV-Save™ 細胞外囊泡封閉試劑添加到細胞培養上清中,100倍稀釋于細胞培養上清,顛倒或輕敲使其混合。
                2. 將EV-Save™ 細胞外囊泡封閉試劑添加到所提取的細胞外囊泡中,100倍稀釋于細胞外囊泡儲存液,顛倒或使其混合。
                3. 保存洗脫后的細胞外囊泡,或者進行后續實驗。  
                EV-Save™ 細胞外囊泡吸附抑制劑產品列表
                產品編號
                產品名稱
                規格
                包裝
                咨詢訂購熱線:400-021-8158
                058-09261
                EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent
                EV-Save™ 細胞外囊泡吸附抑制劑
                研究用
                1mL
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                ■試劑盒產品
                產品編號
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                299-77603
                293-77601
                MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS
                MagCapture™ 外泌體提取試劑盒PS
                研究用
                2次
                10次
                290-35591
                Magnet Stand
                MagCapture™ 系列磁珠捕獲用磁力架
                研究用
                1個
                297-79201
                PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)
                PS Capture™ 外泌體ELISA試劑盒(抗小鼠IgG POD)
                研究用
                96次
                297-79701
                PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit
                PS Capture™外泌體流式試劑盒
                研究用
                300次
                290-80301
                PS Capture™ Exosome Isolation Resin Kit
                研究用
                Kit
                ■抗體
                產品編號
                產品名稱
                交叉性
                包裝
                咨詢訂購熱線:400-021-8158
                016-27061
                012-27063
                Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13)
                抗CD63單抗(3-13)
                20ul
                100ul
                018-27641
                014-27643
                Anti CD63,Monoclonal Antibody (3-13), Fluorescein Conjugated
                抗CD63,單克隆抗體(3-13),熒光素結合
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